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    Q:什么是靶向治療?
    靶向治療是在細胞分子水平上,針對已經明確的致癌位點的治療方式(該位點可以是腫瘤細胞內部的一個蛋白分子,也可以是一個基因片段)??稍O計相應的治療藥物,藥物進入體內會特異地選擇致癌位點來相結合發生作用,使腫瘤細胞特異性死亡,而不會波及腫瘤周圍的正常組織細胞,所以分子靶向治療又被稱為"生物導彈"。
    不同分類的分子靶向藥物針對的是不同的基因靶點,通過驅動基因檢測,可以發現是否存在相應的基因靶點,從而有針對性地為患者選擇合適的靶向藥物。
    Q:FISH、實時熒光定量PCR、二代測序、免疫組化的區別和一般用途?
    (1)FISH(fluorescence in situ hybridization)技術是熒光標記的原位雜交技術。它的基本原理是:如果被檢測的染色體或DNA纖維切片上的靶DNA與所用的核酸探針是同源互補的,二者經變性-退火-復性,即可形成靶DNA與核酸探針的雜交體。該技術不但可用于已知基因或序列的染色體定位,而且也可用于未克隆基因或遺傳標記及染色體畸變的研究。在基因定性、定量、整合、表達等方面的研究中頗具優勢。
    (2)實時熒光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)是一種在DNA擴增反應中,以熒光化學物質測每次聚合酶鏈式反應(PCR)循環后產物總量的方法。通過內參或者外參法對待測樣品中的特定DNA序列進行定量分析的方法。廣泛應用于腫瘤標志物及瘤基因檢測實現腫瘤病診斷;遺傳基因檢測實現遺傳病診斷等各臨床醫學相關的領域。
    (3)高通量測序技術(High-throughput sequencing)又稱“下一代”測序技術("Next-generation" sequencing technology),以能一次并行對幾十萬到幾百萬條DNA分子進行序列測定和一般讀長較短等為標志。廣泛應用于全基因組水平、轉錄組水平上進行全轉錄組測序、進行小分子RNA測序等方面。
    (4)免疫組化又稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學技術(immunocytochemistry),是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及相對定量的研究。在常規腫瘤病理診斷中,5%-10%的病例單靠H.E.染色難以作出明確的形態學診斷。尤其是免疫組化在腫瘤診斷和鑒別診斷中的實用價值受到了普遍的認可,其在低分化或未分化腫瘤的鑒別診斷時,準確率可達50%-75%。
    博奧的腫瘤單基因檢測產品ALK/ROS1/HER-2/RET/MET/BRAF基因檢測,主要應用FISH技術和實時熒光PCR技術進行檢測,在2018版的CSCO肺癌指南中,推薦NSCLC應平行進行EGFR/ALK/ROS1基因的檢測,在標本量有限的情況下,可采用經過驗證的檢測方法同時檢測多個驅動基因的技術, 如多基因同時檢測的PCR技術或二代測序技術(next generation sequencing, NGS) 等。博奧腫瘤的多基因Panel檢測產品主要采用NGS方法,PD-L1、MMR主要采用免疫組化的方法進行檢測,為患者提供多組學、全方位的檢測。
    Q:一名左半結腸癌患者,剛剛完成手術,后期需要進行治療,可以推薦使用哪款產品檢測,說明其原因?
    可以考慮使用結直腸癌靶向用藥指導基因檢測(血液14基因)、結直腸癌靶向用藥指導基因檢測(組織22基因)、標準版腫瘤靶向用藥基因檢測(組織52基因),或使用組織樣本進行KRAS/NRAS/BRAF的單基因檢測。
    原因是抗EGFR靶向治療的療效與部位之間存在很明顯的關系。在左半結腸中,無論是帕尼單抗還是Cet,與單純化療或化療聯合Bev的治療對比,抗EGFR均能帶來顯著獲益;而在右半結腸,與單純化療相比,抗EGFR靶向治療的獲益則明顯減少或不能獲益;Bev在右半結腸的獲益顯著高于抗EGFR靶向治療。故考慮到左半腸患者中使用EGFR單抗,檢測EGFR信號通路基因,使用小Panel即可達到目標且更經濟。
    Q:TMB是什么?
    TMB是Tumor Mutation Burden(腫瘤突變負荷),腫瘤細胞基因組內代表蛋白編碼區的突變分布的密度,以蛋白編碼區的突變位點總數除以蛋白編碼區的總堿基數目,單位為mutations/MB。?
    Q:博奧的腫瘤檢測產品是否有醫療器械注冊證?
    博奧腫瘤產品目前正處于報證階段。目前市場上獲證的產品癌種均為肺癌,報證的基因數為3-10個,雖然醫院可以自己開展檢測,但并不能滿足臨床需求,患者的獲益情況有限;博奧的腫瘤產品線,能夠對腫瘤患者進行全程管理,同時博奧資質齊全,保證了結果的準確性。
    Q:全能版腫瘤個體化用藥指導基因檢測(800基因)計算TMB值準確嗎?
    計算TMB的金標準是組織樣本做全外顯子測序。全能版腫瘤個體化用藥指導基因檢測(800基因)中,有601個基因檢測的是全外顯子區域,是市場上大panel中檢測基因全外顯子數量最多的。全能版腫瘤個體化用藥指導基因檢測(800基因)TMB值與WES一致率高達95.2%,bTMB與組織驗證一致性75.5% 。
    Q:對于尋求靶向藥物的非小細胞肺癌患者來說,做個肺癌小panel就足夠了,做大panel是不是沒有意義?
    患者接受的基因檢測覆蓋面更廣,就更有可能發現潛在的治療方法。這種方法在關鍵時刻能救命,而且例子并不罕見。例如2018年獲批的廣譜靶向抗癌藥拉羅替尼的靶點NTRK基因融合,在肺癌小panel中是不包括這個基因的,組織52基因和800基因均包括NTRK1/2/3融合的檢測。
    Q:乳腺癌BRCA1/BRCA2基因突變檢測的臨床意義,及乳腺癌患者報告問題?
    預防指導:BRAC1/2基因突變可以為高危人群或健康人群的患病風險評估提高參考,通過預防性措施降低發病風險,同時為突變攜帶人群親屬的患病風險提供風險評估參考;用藥指導,BRAC1/2基因突變的乳腺癌卵巢癌患者對鉑類和PARP抑制劑類藥物(奧拉帕尼)敏感; 預后評估,BRAC1/2基因突變攜帶者有相對高的同側乳腺癌復發或對測乳腺癌風險,同時BRAC1/2基因突變是保乳治療的相對禁忌癥。目前我們報告只出具預防指導報告,但很快我們上線針對腫瘤患者的用藥指導報告。
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